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一、PCR扩增效率低 该情况适用于针对所有的基因,特别是内参基因仍无法获得较好的扩增信号时,应考虑如下情况: 1、反应试剂中部分成分比例是否最佳,另外考虑荧光染料是否降解; 2、反应条件不够优化。可适当降低退火温度或改为三步扩增法,适当延长变性退火时间; 3、反应体系中有PCR反应抑制物。一般是加入模板时所引入的,应先把模板适度稀释,再加入反应体系,减少抑制物的影响。
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