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免疫组化常见问题处理之弱阳性

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时间:2022-11-22    浏览:   【 打印此页】  【 关闭


如果阴性对照没有染色而阳性对照标本弱阳性,除了考虑上述因素外,还应考虑:

1、标本的固定方式,不当的固定方式或固定时温度过高,都会影响到所检测的抗原的数量和质量。

2、不适当的抗原修复方式,由于石蜡切片在制作的过程中固定剂对抗原的封闭作用,必须用抗原热修复或酶消化或两种同时使用的抗原双暴露法,至于使用哪一种方法,应参照生产厂家的说明,同时结合标本的具体情况而定。

3、抗体的稀释度是否过高或者孵育的温度/时间是否正确。一般试剂生产厂家都会对试剂给出一定的使用范围,但是由于使用者的标本来自各种组织,处理过程也不尽相同,所以应参照使用范围,对所使用的一抗进行梯度测试,找出最佳的使用浓度。

4、切片上遗留了过多的冲洗液,当抗体加至切片上时,等于人为地对抗体进行了进一步的稀释。

5、孵育时切片是否放置水平,否则会导致抗体流失。如果阴性对照没有反应,阳性对照反应良 好,而标本弱阳性,则可能是由于阳性对照不是同一种组织、或固定方式不同等原因所致。

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