博奥龙Logo
快速订购 快速订购: English 中文版

新闻中心/NEWS

全国免费咨询热线

400-921-8278

新品推荐

产品新闻
北京博奥龙:无血清细胞冻存液对比含血清细胞冻存液的优势​‍
时间:2019-07-01    浏览:   【 打印此页】  【 关闭


细胞冻存是细胞培养技术中细胞进行保种并长期保存的常用方法,其中细胞冻存液,作为细胞冻存时必须使用的一种溶液,不仅仅是说只是用来进行细胞的保存,在细胞的购买、寄赠、交换和运送过程中也起着关键作用,因此选择一款好的细胞冻存液就尤为重要。

 
 

无血清细胞冷冻液

传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量10%,血清的含量是10%,统称为含血清细胞冻存液

 

含血清细胞冻存液的一般的冻存方法是梯度降温冻存法,如先将冷冻管置于4℃冰箱10分钟,然后移至-20℃冰箱30分钟,再移至-80℃冰箱保存16-18个小时(或隔夜),最后才移至液氮罐中进行长期的储存。

(其中需要注意的是-20℃条件下不可超过1个小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量的死亡。)

 
 

可见,含血清细胞冻存液冻存细胞时遇到的问题:

 

1. 冻存细胞时需现配冻存液(如购买市面上通用的含血清细胞冻存液,此步可省略)

2. 需要程序降温(4℃→-20℃→-80℃→液氮),步骤繁琐,耗时耗力

3. 含血清,细胞污染(病毒、霉菌和支原体等)的风险更高

4. 血清批次、品质间差异导致冻存液的批次间差异

5. 需液氮冻存,且不能原位(如孔板)冻存

 

 

QuickFreezing-M是一种具有自主知识产权、独特配方的哺乳动物细胞冻存液,其化学组成明确,以DMEM为母液,含有DMSO,不含牛血清或其他蛋白成分。具有高效、低毒、无外源因子和易于使用等优点,推荐用于常规哺乳动物细胞的冷冻保存。

 

 

QuickFreezing-M无血清细胞冷冻液的使用方法:

 

1.  用37 ℃ 水浴解冻细胞冻存液,并上下振荡数次混匀。备注:为了尽量减少污染,未使用完的细胞冻存液最好冻回-20℃,反复冻融不影响使用效果。

 

2.  用细胞消化液将生长良好的细胞消化成单细胞,并用细胞计数器或血球计数板计数细胞浓度。备注:悬浮细胞不需要消化但仍需要细胞计数,不易消化成单细胞的各种293细胞等最好使用含有EDTA的胰酶进行消化。

 

3.  用低速离心沉淀细胞,弃去上清。备注:通常2000~3000rpm离心5~10min即可。

 

4.  用适量细胞冻存液重悬细胞。备注:细胞浓度可根据情况调整为1~5×10 6 /ml,通常为3×10 6 /ml左右。

 

5.  按每管1ml 分装到细胞冻存管中。

 

6.  直接放入-70 ℃ 冰箱中冻存。备注:无需程序降温盒或从4℃到-20℃到-70℃冰箱的繁琐程序降温。

 

7. 24 小时后转入液氮中冻存。备注:对于不同细胞,使用本细胞冻存液也可在-70℃冰箱中保存数周甚至数月,但建议最好尽快转入液氮中保存。

 

8.  复苏方法同常规细胞冻存液。备注:对于大多数对DMSO不敏感的细胞,复苏时甚至传代前无需去除细胞冻存液,实际上本细胞冻存液中某些成分具有一定的促细胞生长特性。

 

 

可见,Quick-Freezing-M无血清细胞冻存液相对于含血清细胞冻存液的优势有:

 

1. 即用型,无需现配,直接将细胞悬浮于冻存液中即可

2. 通用型,适用于冻存各种细胞系、原代细胞

3. 无需程序降温,可直接放置-80℃冻存,操作简单

4. 不含血清,大大减少细胞污染

5. 因不含血清,批次间差异小

6. 无需液氮,-80℃冰箱长期冻存

7. 可培养板整板冻存,例如杂交瘤细胞冻存时可节省筛选过程

 

 

温馨提示:

 

1. 化学组成明确,以DMEM为母液,含有DMSO,不含牛血清或其他蛋白成分。

2. 独特的细胞保护配方,在冻存过程中细胞可直接放入-70℃冰箱,无需繁琐的程序降温操作。

3. 不含牛血清或其他蛋白成分,不引入造成细胞种子污染的外源因子,如各种牛源病毒和支原体等。

4. 不含牛血清或其他蛋白成分,同样适用于无血清培养的细胞冻存。

5. 不含牛血清或其他蛋白成分,非常适合用于冻存那些在使用常规含牛血清冻存液过程中容易聚团的细胞,如各种293细胞等。

6. 包装设计为10ml×5,无需再次分装,而且在使用过程中不易造成不同使用者或不同细胞间的交叉污染。

7. 经过Hela、RD、HEK-293、293T、SP2/0、K562 和P815等多种细胞的测试,复苏后细胞存活率均高于用常规含牛血清冻存液。

8. 建议冻存24hr后,复苏一支,确认细胞正常,再销毁正在培养的剩余细胞,避免意外。

 

 

北京博奥龙免疫技术有限公司是由留学归国人员创办的生命科学领域高新技术企业,服务内容涵盖抗体制备免疫检测细胞免疫病毒包装免疫佐剂细胞冷存等领域,咨询电话:0512-68216582。


相关产品推荐:
1、
QuickFreezing-M哺乳动物细胞冻存液

联系我们
北京博奥龙免疫技术有限公司
地址:北京市海淀区清河三街95号同源大厦1132室(总部)
电话:400-921-8278
联系人:刘经理
手机:13552826508 / 13552713240
北京博奥龙微信公众号
扫一扫关注我们

Copyright © 2018 北京博奥龙免疫技术有限公司 版权所有 京ICP备12031038号-2 

佐剂 细胞冻存液 抗体制备 慢病毒包装 免疫检测