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脱盐柱只能用来脱盐吗？

时间 10/9/2025 11:02:41 PM

作者

同学：龙宝博士，我的抗体已经成功标记了FITC标签了，但是我想把抗体溶液中的游离FITC去掉，想把缓冲液置换成PBS，我该选用什么产品呢？
龙宝博士：透析、超滤和凝胶过滤（脱盐）是样品缓冲液置换最广泛适用的方法。你可以选择用脱盐柱把缓冲液置换成PBS，脱盐柱就是利用凝胶过滤置换缓冲液的，今天我来给你介绍一下脱盐柱的原理和使用方法吧。

原理

脱盐柱的原理是基于分子筛作用（又称为凝胶过滤层析或者尺寸排阻层析），利用分子大小差异来将目标分子（如蛋白质、核酸）与小分子杂质（如盐离子、未掺入的核苷酸、游离的色素、未反应的标记物等）分离开。
大分子物质因无法进入凝胶孔隙而快速流出色谱柱，小分子因扩散进入孔隙导致迁移路径延长，按分子量从大到小依次洗脱，利用洗脱速度的差异，实现大分子和小分子物质分离回收。

常用于脱盐的介质

葡聚糖凝胶G-10、G-25和G-50是常用的脱盐介质，尤其是G-25。
G后面的阿拉伯数字反映凝胶的吸水量、排阻极限及分离范围。数字小的凝胶，网孔结构紧密，孔径小，吸水率低，排阻极限小，只能分离分子量较小的物质；对应的，数字大的凝胶，孔径大，吸水率高，可分离分子量较大的物质。

在科研和生物制药领域，脱盐和缓冲液置换的常见用途包括：

从蛋白样品中去除盐类
从核酸中去除未结合的核苷酸或苯酚
从偶联蛋白样品中中去除多余的标记或偶联试剂

实验过程

图1 脱盐柱的操作流程

以博奥龙预装脱盐柱（重力/离心）BF06144为例

产品介绍

该产品主要用于蛋白质缓冲液的置换，如盐析法纯化抗体实验中用于去除硫酸铵。
填料颗粒直径在 40-80μm，将大分子（分子量大于5Kd）与盐分离开来，几乎等体积回收，样品不会被稀释，可以在出色地完成蛋白质脱盐的同时保持极高的回收率。代替比较耗时的传统透析处理，以达到快速纯化蛋白、置换缓冲液的目的。

操作方法

1、将 50 毫升离心管盖旋开，取出层析柱；
2. 取下层析柱的上、下盖；
3. 将所希望置换的缓冲液 2ml 加到层析柱中，将层析柱放回离心管中，盖好离心管。配
平后离心，2000rpm，5 分钟，重复 5 次；弃去离心管中的液体，将离心管冲洗干净，
尽量甩干（用于步骤 4 收集所要的液体，也可换一个全新的 50ml 离心管）；
4. 加入 0.1~0.5ml 蛋白质样品，使液体完全进入树脂中；
5. 配平后离心，2000rpm，5 分钟，收集离心管底的液体，为除盐后的蛋白质溶液。
6. 层析柱清洗：在层析柱中加入 2ml 20%乙醇，配平后 2000rpm 离心 5 分钟，重复 3 次；
7. 在层析柱中加满 20%的乙醇，将层析柱上、下盖盖上，2~8℃保存备用。

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脱盐柱只能用来脱盐吗？

原理

常用于脱盐的介质

在科研和生物制药领域，脱盐和缓冲液置换的常见用途包括：

实验过程

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