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常见问题
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Q1:
请问是放几号电池?有什么要求吗?
需自备两节5号电池。请注意不要使用南孚电池,电量过大会有烧毁的风险。
Q2:
乳化失败的原因有哪些?失败了该怎么办?
1. 佐剂成分问题: 弗氏完全佐剂由油相(一般为矿物油)和水相(一般为生理盐水)组成。如果这两个相的配比不正确或者其中某一方受到了污染,可能导致乳化失败。
2、温度问题: 乳化是一个温度敏感的过程。在制备弗氏完全佐剂时,需要确保在适当的温度下进行,通常在室温或稍高于室温的条件下。温度过低或过高都可能影响乳化效果。
3、搅拌力度: 乳化过程中,需要有足够的搅拌力度来使油相和水相充分混合。如果搅拌不够充分,乳化效果可能不佳。 搅拌时间: 乳化需要一定的时间来确保充分的混合。过短或过长的搅拌时间都可能影响乳化的质量。
4、佐剂老化: 弗氏完全佐剂的质量会随着时间的推移而下降。如果佐剂过老,其中的乳化剂可能已经失去了活性,导致乳化效果不佳。
5、材料质量: 使用低质量或受到污染的油相或水相都可能导致乳化失败。 如果在制备弗氏完全佐剂时遇到乳化失败的问题,可以尝试优化上述因素,调整配比、温度、搅拌条件等。
6、更改抗原佐剂的使用比例:由佐剂:抗原 1:1,提高至1:2,增加抗原用量。
7、条件允许的话,可以直接免疫测试能否满足需求。
此外,检查所有用到的材料,确保它们的质量良好。在实验过程中,注意保持操作的干净和规范,避免外部污染的引入。如果问题持续存在,可能需要重新准备佐剂或考虑使用其他适当的佐剂 注意:补加上抗原含有SDS或者有机物,会影响乳化效果。
注:更换QuickAntibody系列水性佐剂,无需乳化,免除乳化烦恼。
Q3:
佐剂乳化器 保修期是多久呢?损坏了可以维修吗?
该产品关键部件为马达和乳化针头,属于耗材类产品,查收后请在1周内完成运行测试,暂无法支持提供维修配件。如有特殊情况,可进一步与我们沟通
Q4:
什么是骨髓瘤细胞8-AG培养基
8-AG(即8-氮鸟嘌呤)是一种碱性细胞杀伤因子。细胞DNA的合成主要是两个途径,一个是主要途径,一个是补救途径,而HGPRT酶(即次黄嘌呤-鸟嘌呤核糖转移酶)是补救途径嘌呤的主要合成酶,正常情况下,细胞可以同时通过这两种途径来合成DNA。而8-AG也是一种嘌呤,自然也可以被认为是一种合成DNA的原料,但由于它是有毒的,它的存在会杀死细胞。而HGPRT酶缺陷的骨髓瘤细胞不能通过补救途径合成DNA,所以就可以存活。因而经8-AG筛选后的sp2/0细胞都是HGPRT酶缺陷株。
Q5:
做杂交瘤融合筛选时没有阳性克隆株
可以通过增加融合后做板子的数量,在10-20块之间,同时适当增加HAT培养基的浓度,换用其他批次Sp2/0细胞。
Q6:
使用乳化器30多分钟还没有形成油包水?
可能存在的原因:
1、
使用乳化器30多分钟还没有形成油包水
可能存在的原因:
(1)抗原缓冲液里有甘油、尿素、有机溶剂等,会影响乳化效果
(2)抗原的浓度太低。
下面是1.5mg/ml的抗原和弗氏完全佐剂等体积混合,乳化5分钟的实验结果:
下面是水和弗氏完全佐剂等体积混合,乳化15分钟的实验结果:
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