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Q1: 可以用全菌来免疫吗

细菌表面都是多糖，很难得到蛋白表位抗体，多糖表位抗体效价高。可以通过BCA定量后去免疫1-5ug尝试

Q2: 为什么我的抗体大部分是IgM？

糖蛋白类免疫原，如CA125，极易产生IgM，很难获得IgG

Q3: 抗原溶剂的选择

溶剂	能否使用
PBS、生理盐水	可以
含有尿素	没有影响，客户反馈最高尿素可以高达6M以上
含有盐酸胍	没有影响
含有咪唑	没有影响，但是建议用PBS透析后再去免疫

Q4: 佐剂适用物种

目前QuickAntibody免疫过：小鼠、大鼠、兔子、豚鼠、山羊、羊驼、鸡、猴子等多种物种，效果均不错。佐剂本身是多种佐剂的混合物，而不是单一佐剂。

物种	佐剂类型	抗原用量ug	抗原体积ul	佐剂体积ul
小鼠	QuickAntibody-Mouse	5~40ug	50	50
大鼠、豚鼠	QuickAntibody-Mouse	20~50ug	70	70
兔子、鸡	QuickAntibody-Rabbit	50~100ug	100	100
山羊、羊驼	QuickAntibody-Rabbit	200~500ug	300~500	300~500
猴子	QuickAntibody-Rabbit	200ug	200~300	200~300

Q5: 五周的标准佐剂有和传统弗氏佐剂的对比结果吗？

有对比数据，可以参考这篇文献【丁宁,石心泉,郭永,张瑶楠,邹检平.一种快速制备甲胎蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的方法[J].生殖医学杂, 2013,22(5):360-363】。请注意仅供参考！不同佐剂的成分有差异，免疫机制有差异，不同的免疫原有佐剂选择性，佐剂也有抗原选择性，所以不存在佐剂适合所有免疫原的情况，因此理论上来说是没有可比性的。

Q6: 冲击免疫的时候能否用免疫原加我们的快速佐剂来免疫，他的免疫原是细胞，不是经过处理的蛋白

冲击免疫的主要作用是可以较高程度的激活脾细胞，对融合后杂交瘤细胞分泌抗体的能力有很大影响，还是会建议直接抗原冲击免疫。而且本身细胞作为免疫原大概率会存在效价低的问题，成分比较杂，目的表位蛋白不一定是优势免疫原。之前严总说接过类似的细胞免疫制备抗体的技术服务基本无法达到实验预期。

Q7: 能否与铝佐剂平行使用

可以结合使用，任何免疫方式都可以产生细胞免疫与体液免疫的效果。

Q8: 弗氏佐剂免疫一针后，后续可否用快速佐剂

可以的，不同佐剂的功能是类似的，不同佐剂可以尝试交叉使用

Q9: 能否-20℃保存

我们佐剂成分非常稳定，做过50℃一个月测试，无影响。但是不能冻存，冻存对免疫效果会有较大影响。一般保存可以放在4℃冰箱靠门的一次，不放在最里面，部分冰箱温控不好，放到最里面温度低于0℃.

Q10: 水佐剂为何比弗氏佐剂贵

单看价格略贵，但是节约时间成本 1、节省一个月的时间成本及小鼠饲养成本 2、节省抗原用量，只需要原来的1/5-1/10，天然抗原1mg售价可达上万元

Q11: 佐剂的区别，如何选择，能否混用

小鼠五周佐剂是最先出来的，在小鼠五周佐剂的基础上优化出来3周佐剂与2周佐剂，主要成分一致，配比略有不同。因此一般不建议混用。兔子与小鼠佐剂差异大小鼠佐剂与兔佐剂不建议混用，佐剂主要成分之一有物种选择性，小鼠佐剂本身可以混用，但是如果时间来得及，不建议混用。

Q12: 虽然抗体效价达到要求，但是小鼠脾脏没有发生肿大的原因

这个正常，传统的佐剂含有卡介苗，卡介苗是强免疫原，脾脏中很多B细胞是针对卡介苗的，所以就会大一些

Q13: 免疫2针后效价不理想

一般免疫原性较弱的抗原或初次使用我们产品的客户，2针后效价可能起不来，此时可以在2免后14天进行第三针免疫，一般可以有一个数量级的增长，但是最多免疫4针，4针后效价仍未起来，一般建议重新免疫或修改抗原。比较常见的是小分子抗原如多肽和小分子。多肽一般可以建议aa数量增加到20个以上，可以有效的增加抗体效价。

Q14: 佐剂的成分

该佐剂是我们公司的保密配方，具体成分不便告知。可以提供一个英文的原理描述：QuickAntibody is a proprietary novel adjuvant designed specifically for the preparation of monoclonal as well as polyclonal antibodies in mice. It is formulated with PAMPs (pathogen associated molecular patterns) and cationic polymers to activate cytosolic PRRs (pathogen recognition receptors).

Q15: 佐剂沉淀

沉淀是我们佐剂的有效成分，不能够离心去除，去年的佐剂沉淀较少，今年佐剂沉淀较多，佐剂在21年11月份做了更新换代，新的佐剂以及验证5年以上时间，效果更好。

Q16: 能否用于疫苗研发

我们的佐剂有成分是用于疫苗研发的，但是合作要22年下半年后，我们佐剂成分是用于人用疫苗佐剂的开发，客户做动物疫苗，一般用不起，除非用于宠物与特种动物。

Q17: 能否用于核酸质粒或RNA的免疫

核酸免疫，我们佐剂不适用，可以采用脂质体。

Q18: 能否用于细胞或病毒等非蛋白类抗原上

我们的佐剂经过数万种抗原免疫实验，目前的抗原种类有细胞、病毒、蛋白、多肽、多糖、脂类、重金属、抗生素、农药、毒品、食品安全类化合物等的免疫，效果均很好，有丰富的工业客户案例以及数百篇文献支持。

Q19: 能否用于真核表达的质粒或者全病毒

质粒不行，蛋白和病毒可以

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Q1: 可以用全菌来免疫吗

Q2: 为什么我的抗体大部分是IgM？

Q3: 抗原溶剂的选择

Q4: 佐剂适用物种

Q5: 五周的标准佐剂有和传统弗氏佐剂的对比结果吗？

Q6: 冲击免疫的时候能否用免疫原加我们的快速佐剂来免疫，他的免疫原是细胞，不是经过处理的蛋白

Q7: 能否与铝佐剂平行使用

Q8: 弗氏佐剂免疫一针后，后续可否用快速佐剂

Q9: 能否-20℃保存

Q10: 水佐剂为何比弗氏佐剂贵

Q11: 佐剂的区别，如何选择，能否混用

Q12: 虽然抗体效价达到要求，但是小鼠脾脏没有发生肿大的原因

Q13: 免疫2针后效价不理想

Q14: 佐剂的成分

Q15: 佐剂沉淀

Q16: 能否用于疫苗研发

Q17: 能否用于核酸质粒或RNA的免疫

Q18: 能否用于细胞或病毒等非蛋白类抗原上

Q19: 能否用于真核表达的质粒或者全病毒

Q20: 抗原溶剂