产品描述
本产品可针对各种类型血液样本,无需进行核酸提取,进行 Taqman Probe 法直接 qPCR 反应,用于 SNP 基因分型检测的专用试剂。
产品中使用了经过定向改造、并进行了抗体封闭的直扩型热启动聚合酶(Hot-Start DNA Polymerase),配 合条件优化的热启动 qPCR 专用缓冲体系,对血液样本中的 PCR 抑制物具有极强的耐受性,可有效避免类 似于非热启动型聚合酶导致的非特异性扩增反应,从而提升 PCR 扩增效率。同时也能够针对不同 GC 含量 的基因完成理想扩增,获得高灵敏度的 qPCR 检测结果。
产品特点
1.无需核酸提取或者纯化,直接对原始血液样本进行 SNP Genotyping qPCR 反应,省时省力;
2.使用了抗体封闭的突变型聚合酶,可以进行 Hot Start 法 PCR 反应,与特别开发的 Buffer 系统相结合 ,具 有高扩增效率、高扩增灵敏度的特点;
3.可针对高 GC 含量片段进行有效扩增,扩增能力强。
扩增体系和条件
1. 样本前处理
将原始血液样本,用 Buffer RLB15 稀释 20-40 倍体积,涡旋混合均匀后,可直接作为 Template 进行 PCR 反应体系构建。建议 Template 加入量为总反应体积的 10~30%。
2.反应体系构建
备注:
0.9 μM 终 浓度 的引物(Primer) 和 0.2 μM 终 浓度 探针 (Probe) ,可 满足 大部 分的 实验 要求 ,用户 亦可 根据 经验 对 Prime 和 Probe 浓度进行调整。
注意事项
1.Master Mix 使用前上下轻柔颠倒数次,确保各试剂成份完全混匀,并短暂离心 收集试剂至容器底部,试 剂如未充分混匀可能导致反应性能下降;
2.Master Mix 置于 4℃的保存时间不应超过 1 周,长期保存置于-20℃;
3.配制 PCR 反应 Mix,各成份依次加入后需涡旋混匀并进行短暂离心;
4.请避免核酸酶污染样本,否则可能造成扩增反应出现困难的情况;
5. ROX Reference 对光敏感,应避免强光照射;
6. 本产品仅供科学研究使用。